추상적인
가을 거세미나방(Spodoptera frugiperda)은 중국에 새로 침입한 옥수수의 가장 중요한 해충 중 하나입니다. 옥수수의 방제 효과를 확인하기 위해 S.frugiperda 유충에 대한 Autographa californica 다중 핵다면체 바이러스(AcMNPV), S.frugiperda에 대한 AcMNPV의 살충 활성 및 생물학적 방제 효과를 연구하고 생물검정 및 현장 효능 시험 방법으로 분석했습니다. 결과는 중앙 치사 농도(LC)50)2에 작용하는 AcMNPV의ndS.Frugiperda의 초기 유충은 2.9x였습니다. 107PIB/mL. 평균 제어 효능은 10입니다.7PIB/mL AcMNPV+Bt 현탁액(1500mL/hm)2) S.frugiperda에서는 10일에 68.99%였습니다.일1일, 15일 66.87%일마지막으로 DNAMAN 6.0 소프트웨어를 사용하여 죽은 곤충의 DNA 상동성을 확인하였고, 그 결과 죽은 곤충과 S.Frugiperda의 polh,lef-8 및 lef-9 유전자 서열이 100인 것으로 나타났다. % 동일합니다. 위의 모든 결과는 AcMNPV가 S.frugiperda를 제어하는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 추가로 확인할 수 있습니다.7PIB/mL AcMNPV+Bt 현탁액(1500mL/hm2)는 S.frugiperda의 어린 유충 발생이 최고조에 달하는 시점과 화창한 날 오후 4시~5시 이후에 적용하여 고온과 빛의 영향을 피하여 바이러스 준비가 더 잘 될 수 있도록 해야 합니다. S.frugiperda에 대한 제어 효과를 향상시키고 역할을 향상시킵니다.
키워드: AcMNPV;스포돕테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda);나비목 해충;애벌레;생물살충제;AcMNPV＋Bt 서스펜션;살충 활성;녹색 예방 및 통제
Spodoptera frugiperda는 잡식성 이동성 해충으로 2019년 미얀마에서 중국으로 처음 유입된 후 중국 26개 성, 자치단체 1,518개 지역으로 급속히 확산되어 중국의 식량안보에 심각한 위협을 가하고 있다. 현재까지 Armyworm의 방제 전략에는 거세미벌레 발병 통제는 여전히 화학 살충제의 과도한 사용에 달려 있습니다.화학 살충제의 남용은 해충 저항성, 재확산 및 환경 잔류물 및 오염을 쉽게 유발할 수 있습니다.일련의 심각한 문제로 인해 현대 농업의 지속 가능한 발전이 심각하게 제한되었습니다. 따라서 생물학적 방제 방법이나 생물 살충제 대체의 사용이 필요합니다.Armyworm을 방제하기 위해 살충제를 사용하는 것이 점점 더 중요해지고 있으며 점점 더 많은 관심을 받고 있습니다.
Autographa californica 다중핵다각체바이러스 AcMNPV는 Argyria alfalfa 유충에서 분리한 다립 내재형 핵다각체 바이러스로, 비트나방, 양배추나방, Argyria argyra, Calyptera teristoides 등 30종 이상의 나비목 해충을 교차 감염시킬 수 있으며, Bt 및 기타 살충제 및 비표적 해충 바이러스를 시너지 효과로 혼합한 유형은 많은 야행성 해충에 대해 명백한 시너지 효과를 가지며 살충 스펙트럼을 더욱 넓히고 살충 효과를 향상시킵니다.AcMNPV는 무한 유니오아시스 생물학 기술 유한회사(Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD)가 개발한 새로운 곤충 바이러스 생물농약입니다.이는 Argyria alfalfa 핵다각체증 바이러스와 Bt 강력한 바이러스 시너지제의 조합입니다.좋은 살충 활성으로 A는 야채, 과수, 쌀 및 기타 분야에 널리 적용되었습니다.본 논문에서는 핵다각체증 바이러스의 광범위한 적용을 위한 자료를 제공하기 위해 Spodoptera frugiperda에 대한 Autographa californica multi-tiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)의 살충 활성 및 생물학적 방제 효과를 실험실 활성 분석 및 현장 실험을 통해 검출하고 평가했습니다. 옥수수에서 Spodoptera frugiperda의 생물학적 방제.이는 Armyworm 제어에 AcMNPV와 Bt의 현탁제 등록 및 적용을 위한 이론적 기초를 제공합니다.
1.재료 및 방법
1.1바이러스 및 생물학적 작용제 테스트
테스트한 바이러스는 Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)였습니다. 2019년 5월 20일 Spodoptera frugiperda는 호북성 Xiantao시의 옥수수 밭에서 수집되었으며 바이러스 감염 선별 테스트는 무한 Unioasis Biological Technology Co.의 실험실에서 수행되었습니다. , LTD.(Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV는 Spodoptera frugiperda에 대해 높은 감염력을 가지고 있음), Spodoptera frugiperda의 유충을 사육하여 증가 및 번식시켰다. 바이러스에 감염된 죽은 유충을 물로 분쇄한 후 3겹의 거즈로 여과한 후 여액을 채취하였다. 600r/min 및 300r/min으로 원심분리하였다. 마이크로카운트는 1.8×1010mL당 독성 다면체(Polyhedralinclusionbody PIB), 즉 순수 기술 등급의 다면체증 바이러스(1.8 x 1010PIB/mL), 저온에 보관하여 따로 보관합니다.
시험된 생물학적 제제는 짧은 AcNPV.Bt(1.0 ×107 PIB/mL)에 대한 Autographa california 핵 다각체증.Bacillus thuringiensis였습니다.이는 무한 Unioasis Biological Technology Co., LTD가 개발하고 자회사인 무한 Chuqiang Biological Technology Co., LTD가 생산합니다.
1.2곤충 테스트
실험 곤충은 Spodoptera frugiperda였습니다.2019년 7월 20일, 호북성 퉁산현 다창진진 반차오 마을 여름 옥수수밭에서 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda) 유충을 수집하여 호북 농업원 식물 보호 토양 비료 연구소 실험실로 가져왔습니다. 과학.신선하고 부드러운 옥수수 잎을 일회용 플라스틱 페트리 접시(직경 8cm, 높이 3cm)에 단일 헤드로 공급했습니다.실내사료조건은 :(25±1)℃, 상대습도 60%-70%, 광주기는 16L:8D이다.여러 세대에 걸쳐 번식한 후 신선하고 멸균된 난 블록을 보관하여 사용합니다.
1.3Spodoptera frugiperda에 대한 Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)의 실험실 활성
6가지 농도 구배, 1.0 ×109, 1.0×108, 1.0×107, 1.0×106, 1.0×105, 1.0×104본 실험에서는 다음과 같이 설계하였다. 먼저 AcNPV의 TC를 1.0×109PIB/mL로 희석한 후 10배 희석하여 농도가 다른 다른 희석제를 얻었습니다. 실험은 공백 대조군으로 처리했습니다. 총 7개의 과정이 수행되었으며, 각 과정은 3회 반복되었습니다.
잎 부분 급식 방식을 채택했는데, 즉 신선한 옥수수 어린 잎(길이 2cm × 폭 2cm)을 먼저 바이러스 현탁 스프레이로 처리한 후 유충에게 먹이고 단일 머리를 페트리 접시에 먹였습니다.사료 공급 스트립은 온도(25±1)℃, 단계별 습도(60% ~ 70%), 광주기(16L:8D)였습니다. 독성 옥수수 잎을 먹은 후 신선한 무독성 옥수수 잎을 첨가해야 합니다. 즉시. 48 Armyworm의 2령 유충을 반복적으로 처리하였다. 참조부분 9{9-11}, 나방과의 세포 및 숙주에서의 바이러스 증식 변화를 고려하면, 바이러스로 인한 죽은 곤충의 수 및 감염 후 7일과 10일째에 죽은 곤충의 총수를 조사하여 사망률을 계산하고 LC50을 계산하였다.
1.4Armyworm 유충에 대한 1,000만 개의 AcMNPV.Bt 현탁액의 방제 효과에 대한 현장 테스트
현장 효능 시험은 후베이성 퉁산현 추앙왕진 샤오위안 마을의 여름 옥수수 밭에서 실시되었습니다.테스트 플롯은 총 1500m입니다.2, 토양형은 석회질 토양, pH 값은 6.8, 유기물 함량은 13.9%, 비옥도는 중~상이다. 옥수수는 연중 재배하며, 옥수수 품종은 시유 3호이다. 7월 13일 ,2020년, 복합비료 45% 750kg//hm2기본비료로 사용하고 파종합니다.2019년부터 이 분야에서는 가을 거염벌레가 심각하게 발생했습니다.
총 1,000만 개의 AcMNPV.BT 현탁액(1500mL/hm)2) 및 15% 에마멕틴 벤조에이트. Indocarb 현탁액(300mL/hm)2), 일반적으로 사용되는 살충제와 블랭크 대조군을 3가지 처리로 처리하였다.각 처리는 총 12개의 실험 플롯으로 4회 반복되었으며 각각 100m의 영역을 포괄합니다.2
2020년 8월 26일 오후(Spodoptera frugiperda 유충이 자주 발생하는 시기) 저녁에 농약을 1회 살포합니다.Lebang 브랜드 3WBJ-16DZ 다기능 백팩 전기 스프레이가 사용되며 작동 압력은 0.40~0.60MPa, 오리피스 직경은 1mm, 유량은 60~85L/h입니다.살충제를 살포하는 날은 날씨가 맑고 기온은 23~32℃입니다.신청 후 1일, 3일, 5일, 7일, 10일, 15일에 설문조사를 실시합니다.조사기간 동안 각 구획에서 무작위로 10개의 표본추출 지점을 채취하였고, 각 지점에서 10개의 식물을 지속적으로 조사하여 총 100개의 식물을 조사하였다.각 옥수수 식물의 살아있는 곤충 수, 사망, 중독 및 천적의 수를 기록했습니다.관련 계산식은 다음과 같습니다.
곤충 감소율 =(살포 전 살아있는 곤충 수 - 살포 후 살아있는 곤충 수)/살포 전 살아있는 곤충 수
예방 및 방제효과=(처리구역 해충 감소율-처리구역 해충 감소율)/(100-처리구역 해충 감소율)*100%
1.5ACMNPV의 분자 식별
1) 바이러스 샘플을 테스트합니다.실내 활동 측정을 위한 ACMNPV 모액 선택(샘플 1), 생물학적 제제 1천만 ACMNPV.Bt SC(샘플 2), 현장 유효성 테스트 후 바이러스에 감염된 곤충 시체(샘플 3) 및 감염된 거세벌레 2세대 유충 선택 샘플 3(샘플 4)에서 채취한 곤충 사체를 시험 바이러스 샘플로 사용하여 1,000만개 ACMNPV.Bt 중 AcMNPV가 가을 거염벌레 유충에 대한 살균 활성을 갖는지 확인하였다.
2) DNA 추출.AcMNPV 시료 1.0 mL를 취하여 증류수 99.0 mL를 넣고 1분간 충분히 진동시킨다.진동 후 300μL 현탁액을 취하고 100μL 알칼리 분해 용액을 첨가한 후 37℃에서 30분간 수조를 수행합니다.200μL Tris·HCl 완충액을 첨가하고 10000 r/min에서 8분간 원심분리합니다.상청액을 원심분리 튜브에 넣고 5μL 프로테아제 K와 60μL SDS를 첨가한 후 65℃에서 2시간 동안 수욕조에서 제거하고 실온으로 냉각합니다.Mix L Tris 포화 페놀 웰 650μL를 첨가하고 10000r/min에서 5분간 원심분리한 후 상청액을 새 원심분리 튜브에 넣습니다.페놀과 클로로포름 혼합액(부피비 1:1) 650μL를 넣고 10000 r/min로 5분간 원심분리한 후 상등액을 새 원심분리 튜브에 담는다.클로로포름과 이소아밀알코올 혼합액(부피비 24:1) 650μL를 넣고 10000r/min로 5분간 원심분리한 후 마지막으로 상층액을 새 원심분리관에 취한다.분광광도계를 사용하여 DNA 농도를 측정합니다.
3) PCR 증폭.T3 슈퍼 믹스 표준 시스템 사용: 샘플 DNA 2 μL. 전후용 프라이머 0.5μL, T3 슈퍼 믹스 18μL 및 ddH2O7μL.PCR 증폭조건은 95℃이다.3분간의 사전 변성 후, 98℃에서 15초, 52℃에서 20초, 72℃에서 20초, 마지막으로 72℃에서 5분간의 사이클을 수행하여 총 42회 사이클을 수행하였다.
4) DNA 아가로스 겔 전기영동.PCR 증폭산물 2μL와 5kb DNA Marker를 취하여 agarose gel에 넣고 180V에서 20분간 전기영동합니다.전기영동 후 겔 이미징 시스템에서 PCR 산물을 관찰합니다.
Polh 업스트림 프라이머:
AGGGTTTCCCAGTCACGGGCTGAG-GATCCTTT
Polh 다운스트림 프라이머:
GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT
Lef-8 업스트림 프라이머:
AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC
Lef-8 다운스트림 프라이머:
GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATTCTTTCGGC
Lef-9 업스트림 프라이머
AGGGTTTCCCAGTCACGAAACGGGTACGCGG
Lef-9 다운스트림 프라이머:
GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC
마지막으로 DNAMAN6.0 소프트웨어를 적용하여 측정된 polh, lef-8 및 lef-9 시퀀스를 비교합니다.
1.6데이터 분석 및 처리
실험 데이터는 IBM SPSS 22.0 데이터 통계 분석 소프트웨어를 사용하여 처리되었습니다.
바이러스 살충 활성 판별 실험에서는 각 농도별로 처리한 죽은 곤충과 살아있는 곤충의 수를 계수하고, 사망률과 조정된 사망률을 계산하여 확률값으로 환산하였다.각 처리 농도는 lg 값으로 변환됩니다.독성 회귀 방정식(기울기 ± SE)은 작업 확률 값과 가중치를 통해 계산되며, LC50값과 95% 신뢰한계를 확인하고 마지막으로 카이제곱 테스트를 수행합니다(2).현장 제어 효과 실험에서는 각 처리구의 살아있는 곤충 수를 계산하고 해충 감소율을 계산했습니다.제어 효과는 Microsoft Excel 편집 공식을 사용하여 계산되었습니다.분석은 Duncan의 방법을 사용하였고, 처리구 간의 유의한 차이를 비교하기 위해 one-way ANOVA를 사용하였으며,
텍스트의 차트는 모두 Microsoft Excel 소프트웨어를 사용하여 작성되었습니다.
2.결과 및 분석
2.1Spodoptera frugiperda 유충에 대한 AcMNPV의 살충 활성
실내 활동성 테스트 결과(표 1)는 치료 7일 후 LC가50Spodoptera frugiperda의 2령 유충에 작용하는 AcMNPV의 수는 4.1x107PIB/mL 및 LC901.05x10이다8PIB/mL.치료 10일 후, LC502령 유충에 대한 AcMNPV 행위의 수는 2.9x107PIB/mL 및 LC907.8x10입니다7PIB/mL.LC50그리고 LC90처리 7일 후 가을 거세미나방 2령 유충에 대한 AcMNPV의 활성은 모두 10일보다 높았으며, 이는 AcMNPV가 7일째 Spodoptera frugiperda 유충에 대해 우수한 살충 활성을 나타냄을 나타냅니다.
2.2 AcMNPV의 현장 제어 효과.Spodoptera frugiperda 유충에 대한 Bt 작용
현장 유효성 시험 결과 1,000만 AcMNPV가 나타났다.Bt SC(1500mL/hm)2)는 spodoptera frugiperda 유충에 상대적으로 느린 영향을 미쳤습니다.살포 후 1일, 3일, 5일째 평균 방제 효과는 각각 11.57%, 16.23%, 15.56%였다.살포 후 7일째 평균 방제 효과는 21.88%에 불과했다.그러나 살포한 지 10일째에는 방충 효과가 68.99%로 갑자기 증가했고, 살포한 지 15일째의 평균 방제 효과도 66.87%로 나타났다.단, 화학약품인 Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% (300mL/hm)에 비해2), 이는 스포도프테라 프루기페르다(spodoptera frugiperda) 유충에 대한 우수한 살상 효과를 나타내어 곤충 개체수를 빠르게 줄일 수 있습니다.투약 후 1일, 3일, 5일, 7일째의 평균 조절 효과는 각각 91.39%, 92.66%, 90.71%, 87.19%였다.그러나 10일차의 평균 방제 효과는 감소하기 시작하여 67.63%에 그쳤고, 15일차의 평균 방제 효과는 51.60%로 감소했습니다.자세한 내용은 표 2를 참조하세요.
동시에, 처리 후 1일, 3일, 5일째에는 대조구의 곤충 감소율이 마이너스를 나타내어 곤충 수가 증가한 것을 확인했습니다.치료 후 7일째부터 양성이 되기 시작했습니다(곤충 개체수가 감소하기 시작했습니다).10일차와 15일차 곤충의 평균 감소율은 각각 38.25%, 47.00%로 이는 스포도프테라 프루기페르다(spodoptera frugiperda) 유충 중 일부가 토양에서 번데기 시작하여 10~15일 후에 세대가 겹치는 것과 관련이 있을 가능성이 높다. .
정리하면 AcMNPV가 1천만개임을 알 수 있다.Bt SC(1500mL/hm)2)은 spodoptera frugiperda에 일정한 방제효과가 있으나 효과가 느리고 도포 후 약 10~15일 정도 효능이 나타난다.
2.3 AcMNPV의 효과.천적에 대한 Bt
현장 실험 중 1천만 AcMNPV의 효과.거미, 무당벌레 및 딱정벌레와 같은 옥수수 해충의 천적에 대한 Bt 현탁액도 조사되었습니다.그 결과 AcMNPV가 1,000만개로 나타났다.Bt 현탁액은 거미, 무당벌레, 딱정벌레 등 천적에 큰 피해를 주지 않았으며, 천적 100그루당 평균 13.4마리가 발생하였다.그러나 화학약품인 Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% 현탁액은 거미, 무당벌레, 딱정벌레와 같은 천적에 심각한 독성 영향을 미쳤습니다.처리 후 첫날에는 옥수수 100그루의 평균 천적 수가 3.1개에 불과했고, 처리 후 3일째에는 다양한 종류의 천적 수가 5.2개만 발견되었습니다(그림 1).AcMNPV가 1천만개임을 알 수 있다.Bt 현탁액은 해충의 천적에 대한 좋은 보호 효과가 있는 반면, Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% 현탁액은 천적에 대한 피해가 상대적으로 더 큽니다.
2.4 AcMNPV의 분자 동정
다양한 테스트 샘플의 PCR 증폭 결과는 샘플 1, 2, 3, 4의 polh, lef-8 및 lef-9의 증폭 단편이 일관되고 크기가 정확하다는 것을 보여주었습니다.polh, lef-8 및 lef-9 유전자의 PCR 산물은 각각 0.54, 0.716 및 0.29kb였으며(그림 2), 이는 AcMNPV가 spodoptera frugiperda 유충에 대해 살충 활성을 가짐을 증명합니다.
마지막으로 DNAMAN 6.0 소프트웨어를 사용하여 샘플 1, 2, 3 및 4에서 polh, lef-8 및 le.f-9의 증폭된 단편에 대한 서열 정렬을 수행했습니다(그림 3).그 결과, 샘플 1, 2, 3, 4의 polh, lef-8, lef-9의 증폭된 서열 간의 유사성은 100%로 나타났으며, 이는 샘플 1, 2, 3, 4가 모두 동일한 바이러스 AcMNPV.
3. 토론
AcMNPV는 섭식을 통해 곤충의 몸에 감염되는 곤충 막대 모양의 바이러스입니다.바이러스는 곤충의 몸 전체로 증식·확산되며 점차 몸 전체를 감염시켜 결국 사망에 이르게 된다.이 연구 결과는 AcMNPV가 Spodoptera frugiperda 유충에 대해 우수한 생물학적 활성을 가지고 있음을 나타냅니다.7일차와 10일차 LC는 각각 4.1x107, 2.9x107PIB/m로 현장에서 좋은 방제 효과를 보였다.1천만 AcMNPV.Bt(1500mL/hm)의 혼합 현탁액2)는 처리 후 10일과 15일에 각각 68.99%와 66.87%로 좋은 평균 방제 효과를 보였으며 천적에도 안전했습니다.따라서 AcMNPV가 Spodoptera frugiperda의 생물학적 방제에 더 큰 역할을 할 수 있도록 연구 개발 속도가 가속화되어야 한다.우한추창생명공학유한회사가 생산한 1천만개 AcMNPV.Bt 현탁액은 AcMNPV와 생물농약 Bacillus thuringiensis(Bt)의 화합물로 바이러스의 살충 활성을 크게 향상시킬 수 있다.Bt는 우수한 미생물 살충 활성을 갖는 광범위한 스펙트럼의 살충제이기 때문에 AcMNPV와 Bt를 병용할 경우 단일 제제에 비해 독성이 크게 향상되어야 합니다.이는 Bt의 살충 범위를 확장할 뿐만 아니라 독성도 향상시켜 단일 제제를 사용하여 여러 해충을 방제하려는 목표를 달성합니다.이는 야채, 과수, 쌀에서 1천만 AcMNPV.Bt의 정지가 널리 촉진될 수 있는 이유이기도 합니다.따라서 1,000만 개의 AcMNPV.Bt가 옥수수의 Spodoptera frugiperda에 대한 녹색 방제제로 홍보될 수 있습니다.
본 연구에서는 현장 유효성 시험을 실시한 결과, 대조구에서 곤충 개체수가 급격히 감소한 경우(15일차 곤충 감소율은 47.00%에 달함), 평균 1천만 AcMNPV.Bt의 방제 효과를 보였다. 현탁액(1500mL/hm2) 치료 후 15일째에는 66.87%로 급격한 상승세를 보였다.화학농약 15% 메톡사졸·인데펜카브SC(300mL/hm)의 평균 방제효과는2) 치료 후 15일째에는 51.60%로 감소하였다.1천만 AcMNPV.Bt 현탁액(1500 mL/hm)이2)은 10일~15일에 Spodoptera frugiperda에 대해 어느 정도 방제효과가 있는 것으로 보아 생물학적 살충제의 효과가 느리고 Spodoptera frugiperda 유충의 수명이 짧고 세대가 겹치는 점을 고려하여 조사횟수를 늘리고 조사기간을 연장할 것을 권고한다. 보다 이상적인 실험 결과를 얻을 수 있는 생물학적 농약(특히 바이러스 제제)의 현장 효능 시험을 수행합니다.이는 본 연구의 한계이기도 하다.요약하면, 생물학적 제제와 비교하여 화학 제제는 해충에 대한 살상 효과가 상대적으로 더 높고 효과가 빠르게 나타납니다.해충이 발생하는 동안 응급 예방 및 통제 조치로 사용할 수 있습니다.해충 피해가 상대적으로 경미한 경우 녹색 예방 및 방제 조치 중 하나로 생물학적 살충제가 화학 살충제를 대체하여 환경 오염을 줄이고 농업 생태를 보호하는 효과를 얻을 수 있습니다.
또한, 본 연구에 사용된 Polh(polyhedrin) 유전자는 다면체 단백질 프로모터의 일종으로, P10과 P10은 BEVS(baculovirus 발현 벡터 시스템)에서 가장 일반적으로 사용되는 프로모터로 둘 다 후기 단계에서 높게 발현된다. 바이러스 감염의[13].그러나 p10 프로모터의 활성은 polh 프로모터에 비해 낮기 때문에 외인성 단백질의 발현을 위해 polh 프로모터가 자주 사용된다.lef-8 유전자는 바이러스 자체의 RNA 중합효소의 가장 큰 하위 단위를 암호화할 수 있으며 후기 발현 인자의 일종입니다.[14].lef-9는 배큘로바이러스에서 lef-4, lef-8 및 p47과 함께 단백질 복합체 하위 단위를 공동 암호화하는 일종의 후기 발현 인자입니다.연구에 따르면 lef-9 유전자가 결여된 바이러스는 감염성 활성을 갖는 바이러스 입자를 생성할 수 없는 반면, lef-9 유전자가 있는 바이러스는 바이러스의 감염성 활성을 복원하여 복원할 수 있는 것으로 나타났습니다.따라서 lef-9 유전자는 바쿨로바이러스가 감염력이 있는 BV(Budded Virus)를 형성하는데 필수적인 유전자이다.[15].lef-8 및 lef-9 유전자는 다양한 유형의 핵다각체증 바이러스에서 높은 보존성을 가지고 있음을 알 수 있으므로 lef-8 및 lef-9 유전자는 바이러스 유형을 식별하는 기초로 사용될 수 있습니다.따라서 본 연구에서는 polh, lef-8, lef-9를 검출 대상으로 사용하였고, 유전자 서열 정렬을 통해 상동성이 높아 모두 100%에 이르렀다.신속한 분자 검출 방법은 AcMNPV가 Spodoptera frugiperda에 대해 우수한 살충 활성을 가짐을 다시 한 번 입증했으며, 이는 Spodoptera frugiperda의 예방 및 방제에 대한 추가 홍보 및 적용에 적합합니다.
2019년부터 Spodoptera frugiperda가 중국에 침입하여 옥수수의 중요한 해충이 되었습니다.중국 남부 및 남서부의 일부 지역에 정착 인구를 형성하여 중국 옥수수 산업에 막대한 손실을 입히고 중국의 식량 안보를 심각하게 위협하고 있습니다.[16].현재 중국의 심각한 Spodoptera frugiperda 예방 및 통제 상황에 직면하여 Spodoptera frugiperda 예방 및 통제를 위한 효율적인 살충제의 스크리닝 및 개발을 가속화하는 것이 시급합니다.[17].바이러스 살충제는 작용 속도가 느리고 살충 범위가 좁기 때문에 광범위한 적용이 제한되어 있지만, 생태 및 환경 보호에 대한 관심이 높아지는 상황에서 바쿨로바이러스 살충제는 다른 바이러스에 비해 상당한 장점으로 인해 농업 생산에 점점 더 널리 사용될 것으로 예상됩니다. 전통적인 살충제.곤충 바이러스 제제는 고온, 햇빛, 비, 해충 연령 등 외부 조건에 대한 민감성으로 인해[18].따라서 해충 유충이 가장 많이 발생하는 시기에 살충제를 살포하는 것이 좋습니다.고온 및 빛과 같은 불리한 환경 조건의 영향을 피하기 위해 화창한 날 오후 4시~5시 이후에 사용하는 것이 가장 좋습니다. 그러면 바이러스 제제가 그 역할을 더 잘 수행하고 해충에 대한 방제 효과를 향상시킬 수 있습니다. .